南海软珊瑚共附生真菌<italic style="font-style: italic">Aspergillus</italic> sp.EGF15-0-3中色酮、蒽醌及其二聚体类化合物

黎咏怡; 蔡金旋; 方越; 李家欣; 钟小倩; 韦霞; 刘炳新; 张翠仙

doi:10.13471/j.cnki.acta.snus.2020C015

欢迎访问《中山大学学报(自然科学版)(中英文)》！ English Version 维普资讯中国知网万方数据

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

南海软珊瑚共附生真菌Aspergillus sp.EGF15-0-3中色酮、蒽醌及其二聚体类化合物

研究论文 | 更新时间：2023-11-01

- 南海软珊瑚共附生真菌Aspergillus sp.EGF15-0-3中色酮、蒽醌及其二聚体类化合物
- Xanthones， anthraquinone and their dimers from soft coral-associated symbiotic and epiphytic fungus Aspergillus sp.EGF15-0-3
- 角色： First author , 第一作者 ,
  
  机构：
  广州中医药大学中药学院，广东广州510006
  
  邮箱： 20211110952@gzucm.edu.cn
  
  简介：黎咏怡（1997年生），女；研究方向：中药学；E-mail：20211110952@gzucm.edu.cn
  
  暂无本作者相关信息
  黎咏怡
  ，
  角色：
  
  机构：
  广州中医药大学中药学院，广东广州510006
  
  邮箱：
  
  暂无本作者相关信息
  蔡金旋
  ，
  角色：
  
  机构：
  广州中医药大学中药学院，广东广州510006
  
  邮箱：
  
  暂无本作者相关信息
  方越
  ，
  角色：
  
  机构：
  广州中医药大学中药学院，广东广州510006
  
  邮箱：
  
  暂无本作者相关信息
  李家欣
  ，
  角色：
  
  机构：
  广州中医药大学中药学院，广东广州510006
  
  邮箱：
  
  暂无本作者相关信息
  钟小倩
  ，
  角色：
  
  机构：
  广州中医药大学中药学院，广东广州510006
  
  邮箱：
  
  暂无本作者相关信息
  韦霞
  ，
  角色：
  
  机构：
  广州中医药大学中药学院，广东广州510006
  
  邮箱：
  
  暂无本作者相关信息
  刘炳新
  ，
  角色： Corresponding author , 通讯作者 ,
  
  机构：
  广州中医药大学中药学院，广东广州510006
  
  邮箱： zhangcuixian@gzucm.edu.cn
  
  简介：张翠仙（1975年生），女；研究方向：天然药物化学；E-mail：zhangcuixian@gzucm.edu.cn
  
  暂无本作者相关信息
  张翠仙
  ，
- 中山大学学报(自然科学版)(中英文) 2022年61卷第4期页码：70-78
- 作者机构：
  
  广州中医药大学中药学院，广东广州510006
- 作者简介：
  
  黎咏怡（1997年生），女；研究方向：中药学；E-mail：20211110952@gzucm.edu.cn
  张翠仙（1975年生），女；研究方向：天然药物化学；E-mail：zhangcuixian@gzucm.edu.cn
- 基金信息：
  
  广东省自然资源厅专项资金(粤自然资合［2020］039;［2021］048);广东省大学生创新创业项目(S202010572122);广东省科技计划(2017A020217008;2015A020216017);广州中医药大学“薪火计划”项目(XH20170110);国家自然科学基金(81741160);广东省自然科学基金(2014A030313411)
- DOI：10.13471/j.cnki.acta.snus.2020C015
  中图分类号： R931.77;O629.7
- 纸质出版日期：2022-07-25，
  
  网络出版日期：2021-07-14，
  
  收稿日期：2020-07-20，
  
  录用日期：2020-10-28
扫描看全文
引用本文

阅读全文PDF
黎咏怡,蔡金旋,方越等.南海软珊瑚共附生真菌Aspergillus sp.EGF15-0-3中色酮、蒽醌及其二聚体类化合物[J].中山大学学报(自然科学版),2022,61(04):70-78.

LI Yongyi,CAI Jinxuan,FANG Yue,et al.Xanthones， anthraquinone and their dimers from soft coral-associated symbiotic and epiphytic fungus Aspergillus sp.EGF15-0-3[J].Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni,2022,61(04):70-78.
黎咏怡,蔡金旋,方越等.南海软珊瑚共附生真菌Aspergillus sp.EGF15-0-3中色酮、蒽醌及其二聚体类化合物[J].中山大学学报(自然科学版),2022,61(04):70-78. DOI： 10.13471/j.cnki.acta.snus.2020C015.

LI Yongyi,CAI Jinxuan,FANG Yue,et al.Xanthones， anthraquinone and their dimers from soft coral-associated symbiotic and epiphytic fungus Aspergillus sp.EGF15-0-3[J].Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni,2022,61(04):70-78. DOI： 10.13471/j.cnki.acta.snus.2020C015.

南海软珊瑚共附生真菌Aspergillus sp.EGF15-0-3中色酮、蒽醌及其二聚体类化合物

黎咏怡 ; 蔡金旋 ; 方越 ; 李家欣 ; 钟小倩 ; 韦霞 ; 刘炳新 ; 张翠仙 ;

PDF下载

摘要

在持续挖掘南海软珊瑚共附生真菌Aspergillus sp. EGF15-0-3结构新颖化合物的过程中，经多种柱色谱技术从其PDA培养基的乙酸乙酯部位分离得到9个色酮、蒽醌及其二聚体类化合物，通过波谱学方法：NMR、MS和ORD等并结合文献数据比对鉴定其结构分别为：eurorubrin （1）、anhydro flavomannin-quinone-6，6′-dimethyl ether （2）、asperflavin （3）、8-O-methyl ether-asperflavin （4）、emodin （5）、1-O-methyl emodin （6）、physcion （7）、rubrocristin （8）和3-O-（α-D-ribofuranosyl）-questin （9）。其中1由两分子3通过亚甲基桥链接而成，而2则是由torosachrysone与大黄素组成的杂合二聚体类化合物。化合物2为首次得到的天然产物，化合物1、2、4和9皆首次从Aspergillus属得到。

译

Abstract

In order to research the novel compounds from the soft coral-associated symbiotic and epiphytic fungus Aspergillus sp.EGF15-0-3， the column chroma tography with SiO₂， ODS， Sephdex LH-20， RP-HPLC， and etc. were carried out， and two xanthones， five anthraquinones and two dimers were isolated from PDA medium. According to the （HR）ESI-MS， 1D and 2D NMR， ORD， UV， and comparison with the literatures， their structures were determined as eurorubrin （1）， anhydro flavomannin-quinone-6，6′-dimethyl ether （2）， asperflavin （3）， 8-O-methyl ether-asperflavin （4）， emodin （5）， 1-O-methyl emodin （6）， physcion （7）， rubrocristin （8）， and 3-O-（α-D-ribofuranosyl）-questin （9）. 1 consisted of two asperflavins， and 2 was a heterodimer of torosachrysone and emodin， and was a firstly natural product. 1， 2， 4 and 9 were obtained from genus of Aspergillus for the first time.

译

关键词

Aspergillus sp.EGF15-0-3; 色酮; 蒽醌; （杂合）二聚体

译

Keywords

Aspergillus sp.EGF15-0-3; xanthones; anthraquinone; dimers

译

色酮、蒽醌及其二聚体类化合物一直是海洋微生物主要的次生代谢产物^［

1-7］，近年来发现系列结构复杂的色酮、蒽醌形成的（杂合）二聚体类化合物^{［参考文献 4-7

4-7］}，它们具有较好的生理活性：如抗肿瘤、抗病毒和抗氧化活性等。目前文献研究发现，已经报道的色酮蒽醌类杂合二聚体类化合物共有4种连接方式，分别为C5—C7′^{［参考文献 8-9

8-9］}、C10—C7′^{［参考文献 10

百度学术

10］}、C7—C7′^{［参考文献 11

百度学术

11］}和C7—C5′^{［参考文献 12

百度学术

12］}（图1）。其中由torosachrysone和大黄素甲醚杂合二聚体的连接方式主要是通过C5—C7′、C7—C7′以及C10—C7′ 3种连接类型（图2）。前期我们报道了从软珊瑚共附生真菌Aspergillus sp. EGF15-0-3的GPY培养基中分离得到了蒽醌和二酮哌嗪等生物碱类成分^{［参考文献 13

百度学术

13］}。为了继续挖掘蒽醌类成分，我们在GNPS和OSMAC策略的指导下^{［参考文献 14

百度学术

14］}，从此菌的PDA培养基中不仅得到了结构丰富的二酮哌嗪类生物碱^{［参考文献 15

百度学术

15］}，还得到了2个色酮：asperflavin（3）和8-O-methyl ether-asperflavin（4）；5个蒽醌（苷）类化合物：emodin（5）、1-O-methyl emodin（6）、physcion（7）、rubrocristin（8）和3-O-（α-D- ribofuranosyl）-questin（9）；2个色酮和蒽醌（杂合）二聚体类化合物：eurorubrin（1）和anhydro flavomannin-quinone-6，6′-dimethyl ether（2）（图3）。其中1由两分子3通过亚甲基桥链接而成，而2则是由色酮与大黄素组成的杂合二聚体类化合物。2为首次得到的天然产物。化合物1、2、4和9首次从Aspergillus属得到。本研究为此系列化合物的进一步挖掘工作提供了指引方向。

译

图1 目前文献报道的色酮和蒽醌类杂合二聚体类化合物连接位置及连接方式示意图

Fig.1 Connective position and types of known heterodimers between xanthones and anthraquinone

下载: 原图 | 高精图 | 低精图

图2 目前torosachrysone和大黄素甲醚杂合二聚体的3种连接方式

Fig.2 Three types of connective position of dimers between torosachrysone and emodin

下载: 原图 | 高精图 | 低精图

图3 从软珊瑚共附生真菌Aspergillus sp. EGF15-0-3中分离得到化合物1~9

Fig.3 Compounds 1-9 from Aspergillus sp. EGF15-0-3 on the PDA medium

下载: 原图 | 高精图 | 低精图

1 实验部分

1.1　仪器、试剂与材料

论文中菌种、微生物发酵用培养基、次生代谢产物提取与分离、化合物结构鉴定所用的仪器、试剂和材料与文献［

16］相同。

译

1.2　菌株EGF 15-0-3培养

菌株EGF15-0-3的复苏、种子液培养及菌株发酵过程与文献［

16］相同。

译

1.3　菌株EGF 15-0-3的提取分离

菌株后处理及次生代谢产物的分离、纯化见图4。其中YMC色谱柱规格为YMC-Pack ODS-A/S 5 μm /12 nm， 250 mm×10.0 mm；Kromasil半制备柱规格为10 mm×250 mm、5 µm。

译

图4 化合物1~9分离流程图

Fig.4 The flowing chart of compounds 1-9 from Aspergillus sp.EGF15-0-3

下载: 原图 | 高精图 | 低精图

1.4　物理常数和波谱数据

Eurorubrin（1）黄绿色无定型粉末（甲醇），甲醇溶液在自然光下显蓝绿色荧光，分子式 C₃₃H₃₂O₁₀， ${[α]}_{D}^{20}$ + 8.0° （c 0.20， MeOH）；¹H NMR （CD₃OD， 400 MHz）δ_H和¹³C NMR （CD₃OD，100 MHz）δ_C见表1； HR-ESI-MS m/z： 611.187 5［M+Na］⁺（Cal. 611.189 3）。

译

表1 化合物1、 3和4的NMR数据表^1）

Table 1 NMR data of compounds 1， 3 and 4 （CD₃OD）

No.	1		No.	3		4
No.	δ_H，mult，J/Hz	δ_C，mult	No.	δ_H，mult，J/Hz	δ_C，mult	δ_H，mult，J/Hz	δ_C，mult
1/1′		203.8，s	1		204.1，s		204.5，s
2/2′	2.65，m，2H	52.4，t	2	2.80，brd，16.8，1H 2.73，brd，16.8，1H	52.5，t	2.78，m，2H	52.6，t，
3/3′		71.3，s	3		71.3，s		71.3，s
4/4′	2.83，brs，2H	44.3，t	4	2.97，brd，15.6，1H 3.01，brd，15.6，1H	44.1，t	3.10，m，2H	44.1，t
4a/4a′		137.4，s	4a		138.4，s		138.9，s
5/5′		114.1，s	5	6.52，d，1.8，1H	103.5，d	6.69，d，2.0，1H	100.2，d
6/6′		159.3，s	6		161.95，s		163.8，s
7/7′	6.53，s，1H	99.0，d	7	6.43，d，1.8，1H	98.9，d	6.49，d，2.0，1H	98.9，d
8/8′		160.9，s	8		162.9，s		162.4，s
8a/8a′		109.7，s	8a		110.3，s		111.1，s
9/9′		166.3，s	9		166.5，s		166.1，s
9a/9a′		110.4，s	9a		110.1，s		110.9，s
10/10′	7.32，s，1H	115.7，d	10	6.77，s，1H	117.7，d	6.94，s，1H	118.4，d
10a/10a′		142.2，s	10a		143.7，s		143.6，s
11	4.22，s，2H	21.4，t	11	1.35，s，3H	28.9，q	1.37，s，3H	28.9，q
12/12′	1.27，s，3H	29.0，q	12			3.91，s，3H	56.0，q
13/13′	3.88，s，3H	56.2，q	13	3.90，s，3H	56.3，q	3.90，s，3H	56.4，q
			3-OH	4.81^*，s，1H
			6-OH	10.28^*，s，1H
			9-OH	14.96^*，s，1H

1） *代表¹H NMR数据来源于DMSO-d₆溶剂测试。

下载: CSV

下载: 表格图片

Anhydro flavomannin-quinone-6，6′-dimethyl ether（2）暗红色无定型粉末（甲醇），分子式为C₃₂H₂₆O₁₀， ${[α]}_{D}^{20}$ =+56.5° （c 0.03， MeOH）；¹H NMR （CD₃OD， CDCl₃， 400 MHz） δ_H和¹³C NMR （CD₃OD，100 MHz） δ_C见表2； HR-ESI-MS m/z： 593.141 3 ［M+Na］⁺ （Cal. 593.142 4）。

译

表2 化合物2 的¹H NMR（溶剂CD₃OD、CDCl₃）和¹³C NMR数据表

Table 2 ¹H NMR （CD₃OD and CDCl₃） and ¹³C NMR （CD₃OD） data of compound 2

No.	δ_H，mult，J/ Hz		δ_C，mult	No.	δ_H，mult，J/ Hz		δ_C，mult
No.	CD₃OD	CDCl₃	δ_C，mult	No.	CD₃OD	CDCl₃	δ_C，mult
1			204.2, s	1′			163.5, s
2	2.67, m, 2H	2.67, s, 2H	53.4, t	2′	6.84, d, 1.6, 1H	6.66, s, 1H	136.9, d
3			71.2, s	3′			130.7, s
4	2.76, m, 2H	2.86, s, 2H	44.0, t	4′	6.33, d, 2.0, 1H	6.81, s, 1H	106.2, d
4a			141.9, s	4a′			138.5, s
5	6.64, s, 1H	6.59, s, 1H	99.1, d	5′	6.66, s, 1H	6.70, s, 1H	102.3, d
6			162.2, s	6′			166.7, s
7			110.8, s	7′			110.3, s
8			167.3, s	8′			163.7, s
8a			113.7, s	8a′			109.0, s
9			167.3, s	9′			189.5, s
9a			128.5, s	9a′			151.0, s
10	6.17, s, 1H	6.07, s, 1H	115.2, d	10′			186.1, s
10a			158.4, s	10a′			143.3, s
11	1.21, s, 3H	1.25, s, 3H	28.9, q	11′	1.90, s, 3H	2.00, s, 3H	16.6, q
12	4.01, s, 3H	4.02, s, 3H	56.7, q	12′	3.95, s, 3H	3.82, s, 3H	56.4, q
9-OH		15.92, s, 1H		1′-OH		14.87, s, 1H

下载: CSV

下载: 表格图片

Asperflavin（3）蓝绿色粉末（甲醇），分子式为C₁₆H₁₆O₅，紫外灯365 nm下呈亮蓝色荧光， FeCl₃显蓝色， ${[α]}_{D}^{20}$ +4° （c 0.08， MeOH），分子式C₁₆H₁₆O₅；¹H NMR（CD₃OD，DMSO-d₆，600 MHz）δ_H和¹³C NMR （CD₃OD， 125 MHz） δ_C见表1； ESI-MS m/z： 287 ［M-H］^-。

译

8-O-methyl ether-asperflavin（4）浅黄色针晶（甲醇），分子式为C₁₇H₁₈O₅， ${[α]}_{D}^{20}$ = + 8.1° （c 0.04， MeOH）；¹H NMR（CD₃OD，400 MHz）δ_H和¹³C NMR （CD₃OD，100 MHz） δ_C见表1； HR-ESI-MS m/z：303.122 9［M+H］⁺（Cal. 303.123 2）。

译

Emodin（5）橙红色针状结晶（甲醇），分子式为C₁₅H₁₀O₅，θ_mp 265~267 ℃，紫外灯365 nm下呈红色荧光。¹H NMR （400 MHz， Pyr-d₅） δ_H和¹³C NMR （100 MHz， Pyr-d₅） δ_C见表3； ESI-MS m/z：269［M-H］^-。

译

表3 化合物5~9的NMR 数据表（5~8：Pyr-d₅， 9：CD₃OD）

Table 3 NMR data of compounds 5-9 （5-8 in Pyr-d₅ and 9 in CD₃OD）

No.	5		6		7
No.	δ_H， mult， J/ Hz	δ_C， mult	δ_H， mult， J/ Hz	δ_C， mult	δ_H， mult， J/ Hz	δ_C， mult
1		162.3, s		163.0, s		161.7
2	7.70, brs, 1H	124.2, d	7.14, brs, 1H	124.7, d	7.14, brs, 1H	123.6, d
3		148.0, s		146.7, s		147.7
4	7.47, brs, 1H	120.8, d	7.67, brs, 1H	119.7, d	7.71, brs, 1H	121.4, d
4a		135.6, s		138.1, s		135.3
5	7.70, d, 2.4, 1H	109.8, d	7.80, d, 2.4, 1H	108.0, d	7.51, d, 2.4, 1H	109.5, d
6		167.1, s		166.1, s		165.9
7	6.99, d, 2.4,1H	108.5, d	7.06, d, 2.4, 1H	105.7, d	6.91, d, 2.4, 1H	107.3, d
8		165.6, s		164.3, s		164.5
8a		109.9, s		115.5, s		113.1
9		190.3, s		187.5, s		189.9
9a		113.9, s		113.9, s		113.1, s
10		181.8, s		183.2, s		180.7
10a		133.4, s		133.1, s		132.6
11	2.23, s, 3H	21.4, q	2.22, s, 3H	21.6, q	2.25, s, 3H	20.7
1-O-CH₃			3.91, s, 3H	56.4, q
6-O-CH₃					3.78, s, 3H	56.7, q
1-OH	12.44, s, 1H				13.99, s, 1H
6-OH			13.00, s, 1H
8-OH			13.96, s, 1H		12.3, s, 1H
No.	8		9
No.	δ_H, mult, J/Hz	δ_C, mult	δ_H, mult, J/Hz	δ_C, mult
1		156.9, s		164.6, s
2	7.24, brs, 1H	130.3, d	7.43, s, 1H	125.3, d
3		147.1, s		164.3, s
4		157.7, s	7.02, s, 1H	108.2, d
4a		138.4, s		133.7, s
5	7.81, d, 2.0, 1H	107.9, d	7.32, s, 1H	120.7, d
6		166.3, s		148.5, s
7	7.10, d, 2.0, 1H	106.5, d	6.93, s, 1H	107.7, d
8		164.7, s		163.6, s
8a		114.6, s		116.3, s
9		186.2, s		188.6, s
9a		112.9, s		115.8, s
10		188.1, s		183.5, s
10a		138.0, s		138.3, s
11	2.26, s, 3H	16.4, q	2.36, s, 3H	21.9, q
6-O-CH₃		55.8, q
8-O-CH₃	3.91, s, 3H		3.92, s, 3H	57.0, q
1-OH	13.99, s, 1H
4-OH	14.32, s, 1H
8-OH	13.52, s, 1H
1′			5.83, d, 4.0, 1H	101.8, d
2′			4.32, t, 5.2, 1H	73.6, d
3′			4.17, m, 1H	71.1, d
4′			4.40, m, 1H	88.6, d
5′			3.72, m, 2H	63.2, t

下载: CSV

下载: 表格图片

1-O-methyl emodin（6）砖红色片状晶体（甲醇），分子式为C₁₆H₁₂O₅，θ_mp 203~207 ℃，紫外灯365 nm下呈红色荧光。¹H NMR（400 MHz， Pyr-d₅） δ_H和¹³C NMR （100 MHz， Pyr-d₅） δ_C见表3； ESI-MS m/z： 283［M-H］^-。

译

Physcion（7）橙黄色针状结晶（甲醇），分子式为C₁₆H₁₂O₅，θ_mp 284~286 ℃，紫外灯365 nm下呈红色荧光。¹H NMR （400 MHz， Pyr-d₅） δ_H和¹³C NMR （100 MHz， Pyr-d₅） δ_C见表3； ESI-MS m/z： 283［M-H］^-。

译

Rubrocristin（8）红色针状结晶（甲醇），分子式为C₁₆H₁₂O₆，θ_mp 280~281 ℃，紫外灯365 nm下呈红色荧光。¹H NMR （500 MHz， Pyr-d₅） δ_H和¹³C NMR （125 MHz， Pyr-d₅） δ_C见表3； ESI-MS m/z： 299 ［M-H］^-。

译

3-O-（α-D-ribofuranosyl）-questin（9）橙黄色不定形粉末，分子式为C₂₁H₂₀O₉， ${[α]}_{D}^{20}$ = +88.4° （c 0.04， MeOH），¹H NMR（CD₃OD，400 MHz） δ_H和¹³C NMR （CD₃OD， 100 MHz） δ_C见表3；HR-ESI-MS m/z： 417.117 7 ［M+H］⁺（Cal. 417.118 6）。

译

2 结果与讨论

Eurorubrin（1）黄绿色无定型粉末，甲醇溶液在自然光下显蓝绿色荧光，HRESIMS给出的准分子离子峰m/z： 611.187 5［M+Na］⁺（计算值为611.189 3），分子式为 C₃₃H₃₂O₁₀，U=18。¹H NMR谱中给出1组甲基信号δ_H 1.27（3H， s），3组亚甲基δ_H 2.65（m， 2H）、2.83（brs， 2H）和4.22（s， 2H， H-11），一组甲氧基3.88（s， 3H）以及两个芳香质子信息6.53（s， 1H）和7.32（s， 1H）。¹³C NMR谱中给出17个碳信号包括10个C、3个CH、2个CH₂和2个CH₃。综合分析其NMR和MS数据，推测1可能为由一个亚甲基相连的asperflavin^［

17］二聚体，asperflavin （3）也在该真菌中分离得到。比较1和asperflavin （3）的NMR数据发现在¹³C NMR谱中次甲基信号［3：δ_C 103.5 （d， C-5）］变成了季碳信息［1：δ_C 114.1 （s， C-5）］，且在¹H NMR谱中也缺少了一个芳香质子信号（3：6.52， d， 1.8， 1H）。在1的NMR图谱中比asperflavin多出了一个亚甲基碳信号［δ_H 4.22 （2H， s， H-11）和δ_C 21.4 （t， C-11）］。HMBC给出H-11→C5/C6/C10a相关信息证实了两个asperflavin是通过一个亚甲基在5，5′位相连。将化合物旋光数据与asperflavin （3）（

${[α]}_{D}^{20}$ + 4 °（c = 0.08， MeOH）对比，数值接近，说明C-3位的立体构型与asperflavin （3）相同。将数据与eurorubrin^{［参考文献 7

百度学术

7］}对照，发现基本一致，故确定1为eurorubrin，此化合物目前报道仅来源于Eurotium属，该化合物首次从Aspergillus属中得到。

译

Anhydro flavomannin-quinone-6，6′-dimethyl ether（2）暗红色粉末，KOH显色呈粉红色，提示为蒽醌类物质。HRESIMS给出的准分子离子峰m/z： 593.141 3［M+Na］⁺（Cal.593.142 4），分子式为C₃₂H₂₆O₁₀，U=20。¹H NMR（CDCl₃）谱中显示有两个分子内氢键相关羟基信号δ_H 15.92（1H，s，9-OH）和δ_H 14.87（1H，s，1′-OH）。¹H NMR（CD₃OD）谱中显示5个芳香质子δ_H 6.17（1H，s，H-10）、6.64（1H，s， H-5）、6.84（1H，d，1.6，H-2′）、6.33（1H，d，2.0，H-4′）和6.66（1H，s，H-5′），2个甲氧基δ_H 3.95（3H，s，6′-OCH₃）和4.01（3H，s，6-O-CH₃）、1个芳香甲基δ_H1.90（3H，s，3′-CH₃）、1个脂肪族甲基δ_H 1.21（3H， s， 3-CH₃）和2个亚甲基δ_H 2.67（2H， m， H-2）和δ_H 2.76（2H， m， H-4）。结合¹³C NMR（CD₃OD）谱给出32个碳信号，包括21个C、5个CH、2个CH₂和4个CH₃。综合分析其NMR和MS图谱，可知该化合物应为二聚体结构类型，且为torosachrysone^［

18］和大黄素甲醚^{［参考文献 19

百度学术

19］}的杂合二聚体。在常见的3种连接方式中（图2），以C5—C7′链相连的来源于植物Senna multiglandulosa的杂合二聚体Torosanin-9′，10′-quinone和以C10—C7′链相连的anhydrophlegmacin-9′，10′-quinone为天然产物，而目前发现的以C7—C7′链相连的anhydro flavomannin-quinone-6，6′-dimethyl ether怀疑为人工产物。HMBC显示δ_H 6.17→δ_C44.0/71.2/113.7/143.3 /162.2/204.2相关，说明连接位点不在torosachrysone的C10位，连接方式为C5—C7′或C7—C7′。HMBC另一相关片段δ_H 6.64→δ_C110.8/113.7/158.4/162.2/ 166.7，且δ_H 6.64对应的C的化学位移值为99.1，说明连接方式应为C7—C7′链相连。而在分离过程中未接触任何特殊试剂和特殊操作，故确定2为首次从海洋Aspergillus属真菌中分离得到的天然产物。

译

化合物3，蓝绿色粉末（甲醇），紫外灯365 nm下呈亮蓝色荧光，FeCl₃显蓝色。ESI-MS m/z： 287［M-H］^-及NMR推断其分子式为C₁₆H₁₆O₅，不饱和度为9。由NMR及DEPT数据知，3含有1个叔甲基（δ_H 1.35， s， 3-CH₃）；1个甲氧基（δ_H 3.90， s， 8-OCH₃）；2个脂肪族亚甲基（δ_H 2.73， brd， 16.8， H-2； 2.80， brd， 16.8， H-2； 2.97， brd， 15.6， H-4； 3.01， brd， 15.6， H-4）；3个芳香质子（δ_H 6.52， d， 1.8， H-5； 6.43， d， 1.8， H-7； 6.77， s， H-10）；1个酮羰基（δ_C204.1， s）。DMSO-d₆溶剂测试在低场给出活泼氢之子信号：（δ_H 4.81， s， 3-OH；10.28， s， 6-OH和14.96， s， 9-OH）。HMBC显示C和H的远程关系：H-2（δ_H 2.73， brd，16.8）和C-1，C-3，3-CH₃；H-4（δ_H 2.97， brd，15.6）和C-3， C-9a， C-10；H-5（δ_H6.52， d， 1.8）和C-6， C-8a；H-7（δ_H 6.43， d， 1.8）和C-6， C-8；H-10（δ_H 6.77， s）和C-8a， C-9a， C-10a相耦合（见图5）。根据以上波谱分析，将该化合物3的NMR数据与文献asperflavin^［

17，20-21］数据对比，基本一致，故3确定为asperflavin。

译

图5 化合物3的结构式和HMBC相关性

Fig.5 The structure and key HMBC of 3

下载: 原图 | 高精图 | 低精图

8-O-methyl ether-asperflavin（4）浅黄色针晶，HRESIMS给出的准分子离子峰m/z： 303.122 9 ［M+H］⁺（Cal.303.123 2），分子式为C₁₇H₁₈O₅，不饱和度为9。¹H NMR谱中给出1组甲基信号δ_H 1.37（3H，s，H-11），两组亚甲基δ_H 2.78（2H，m，H-2）和3.10（2H， m， H-4），两组甲氧基3.91（3H， s， H-12）和3.90（3H， s， H-13）以及3组芳香质子信息6.94（1H， s， H-10）、6.69（1H， d， 2.0， H-5）和6.49（1H， d， 2.0， H-7）。¹³C NMR谱中给出17个碳信号包括9个C、3个CH、2个CH₂基和3个CH₃。δ_C 204.5（s， C-1）为孤立羰基信号，δ_C 71.3（s， C-3）为连氧季碳，52.6（t， C-2）和44.1（t， C-4）为亚甲基碳信号但化学位移值明显向低场移动。对比化合物4与3发现，二者结构十分相似，只是比3增加了一个甲氧基信息。将4的NMR数据与（S）-torosachrysone-8-O-methyl ether对比^［

22］，二者基本一致，故确定4为8-O-methyl ether-asperflavin。

译

化合物5，橙红色针状结晶（甲醇），紫外灯365 nm下呈红色荧光，KOH显色呈粉红色，提示为蒽醌类物质。ESI-MS m/z： 269[M-H]^-结合NMR推断其分子式为C₁₅H₁₀O₅，不饱和度为11。¹³C NMR中δ_C190.3（s）和181.8（s）出现两个羰基信号；同时¹H NMR谱中δ_H12.44(1H, s)显示存在分子内氢键质子信号; 7.70 (1H, brs), 7.47 (1H, brs), 7.70 (1H, d, 2.4) 和6.99 (1H, d, 2.4) 给出芳香环质子信息；另外还有1个与芳香环相连的甲基信号2.23（3H, s）。将5的NMR数据与大黄素（emodin）^［

23］数据对照，二者基本一致。故确定5为大黄素。

译

化合物6，砖红色片状结晶（甲醇），而7为橙黄色针状结晶（甲醇），二者KOH显色呈红色，提示为蒽醌类化合物，且紫外灯365 nm下呈红色荧光。二者ESI-MS m/z均为283[M-H]^-，结合NMR推断其分子式为C₁₆H₁₂O₅，不饱和度为11。对比6、7和5的NMR信息发现，仅比5多了一个甲氧基信息。分别将6和7的NMR数据与文献1-O-methyl emodin^［

23-24］和physcion^{［参考文献 23

百度学术

23］}数据对照，基本一致。故确定6为1-O- methyl emodin，7为physcion。二者的差别在于甲氧基取代位置不同。而8亦为红色针状结晶（甲醇），紫外365 nm和KOH显色与6和7相似，提示其也为蒽醌类化合物。与7相比增加了1个分子内氢键信息δ_H14.32（1H，s），减少了1个芳基质子信息7.71（1H，brs）。将8的NMR数据与rubrocristin^{［参考文献 20

百度学术

20］}数据对比，基本一致。故确定8为rubrocristin。

译

化合物9，橙黄色不定形粉末，KOH显色呈粉红色，Molish反应呈阳性提示其为蒽醌苷类物质。HRESIMS给出的准分子离子峰m/z： 417.117 7［M+H］⁺（Cal.417.118 6），分子式为C₂₁H₂₀O₉，不饱和度为12。将9的NMR与5对照，发现增加6个连氧碳的质子信息δ_H4.17 (1H, m, H-3′)、4.32 (1H, t, 5.2, H-2′)、4.40 (1H, m, H-4′)、5.83 (1H, d, 4.0, H-1′)、3.92 (3H, s, H-12)、3.72 (2H, m)和连氧碳信息δ_C 71.1 (d, C-3′)、73.6 (d, C-2′)、88.6 (d, C-4′)、101.8 (d, C-1′)、63.2 (t, C-5′)和57.0 (q, -OCH₃)。暗示其连接一个五碳糖，且含有一个甲氧基。将9的NMR数据与3-O-（α-D-ribofuranosyl）-questin^［

7］对比，基本一致，故确定9为3-O-（α-D-ribofuranosyl）-questin。

译

3 结论

从软珊瑚共附生真菌Aspergillus sp. EGF15-0-3的PDA培养基中共分离得到9个色酮、蒽醌及其二聚体类单体化合物。化合物2是首次获得的天然产物，化合物1、2、4和9首次从Aspergillus属中分离得到。此类成分与临床常用含蒽醌类成分的中药大黄^{［26（P24），27］}、虎杖^{［25，26（P217）］}、何首乌^{［19，26（P183）］}和番泻叶^{［26（P362）］}等具有相同或相似的结构，从某种角度讲海洋微生物可以提供此类中药的单体化合物，来缓解此类药材的胡乱采挖而带来的环境破坏问题。同时对蒽醌-色酮部位体外药理活性测试表明在ρ为200 μg/mL时对吉非替尼耐药细胞株H1975/GR的抑制率为69.60%，而单体化合物3、5~8在50 μg/mL时，仅化合物6对吉非替尼耐药细胞株H1975/GR的抑制率为45.68%。在对此菌的不同培养基产生的次生代谢产物通过GNPS、NMR和TLC分析发现^［

14-15］，此菌具有很强的代谢能力，不同的培养基明显产生不同的代谢产物，且存在大量结构新颖的化合物，其分离工作正在进行中。

译

参考文献

CARROLL A R， COPP B R， DAVIS R A， et al. Marine natural products［J］. Natural Products Report， 2020， 37：175-223. [百度学术]

CARROLL A R， COPP B R， DAVIS R A， et al. Marine natural products［J］. Natural Products Report， 2019， 36： 122-173. [百度学术]

BLUNT J W， CARROLL A R， COPP B R， et al. Marine natural products［J］. Natural Products Report， 2018， 35：122-173. [百度学术]

ZHENG C J， SHAO C L， GUO Z Y， et al. Bioactive hydroanthraquinones and anthraquinone dimers from a soft coral-derived Alternaria sp. fungus［J］. Journal of Natural Products， 2012， 75： 189-197. [百度学术]

SHAABAN M, SHAABAN K A, ABDELAZIZ M S.Seven naphtho-γ-pyrones from the marine-derived fungus Alternaria alternata: Structure elucidation and biological properties[J]. Organic Medicine Chemistry Letter, 2012, 2: 6. [百度学术]

HUANG C H， PAN J H， CHEN B， et al. Three bianthraquinone derivatives from the mangrove endophytic fungus Alternaria sp. ZJ9-6B from the South China Sea［J］. Marine Drugs， 2011， 9： 832-843. [百度学术]

LI D L, LI X M, WANG B G. Natural anthraquinone derivatives from a marine mangrove plant-derived endophytic fungus Eurotium rubrum: Structural elucidation and DPPH radical scavenging activity[J]. Journal of Microbiology and Biotechnology, 2009, 19(7): 675-680. [百度学术]

KITANAKA S， TAHIDO M. Dimeric hydroanthracenes from the unripe seeds of Cassia torosa［J］. Phytochemistry， 1982， 21（8）： 2103-2106. [百度学术]

ABEGAZ B M， BEZABEH M， ALEMAYEHU G， et al. Anthraquinones from Senna multiglandulosa［J］. Phytochemistry， 1994， 35（2）： 465-468. [百度学术]

TAKAHASHI S， KITANAKA S， TAKIDO M， et al. Phlegmacins and anhydrophlegmacinquinones： Dimeric hydroanthracenes from seedlings of Cassia torosa［J］. Phytochemistry， 1977， 16（7）： 999-1002. [百度学术]

STEGLICH W， PETERSEN E T， REININGER W， et al. Isolation of flavomannin-6，6′-dimethyl ether and one of its racemates from higher fungi［J］. Phytochemistry， 1972， 11（11）： 3299-3304. [百度学术]

OLA A R B， DEBBAB A， KURTÁN T， et al. Dihydroanthracenone metabolites from the endophytic fungus Diaporthe melonis isolated from Annona squamosa［J］. Tetrahedron Letters， 2014， 55（20）：3133-3136. [百度学术]

李秀婷，刘炳新，胡谷平，等. 南海珊瑚共附生真菌NG-15-3中蒽醌和含氮类次生代谢产物研究［J］. 中山大学学报（自然科学版）， 2016， 55（1）： 96-101. [百度学术]

FENG C, WEI X, HU J S, et al. Researches on the subergane-type sesquiterpenes from the soft coral-derived fungus Aspergillus sp. EGF15-0-3[J]. Chinese Journal of Organic Chemistry, 2020, 40(5): 1275-1280. [百度学术]

WEI X， FENG C， WANG S Y， et al. New indole diketopiperazine alkaloids from soft coral-associated epiphytic fungus Aspergillus sp. EGF 15-0-3［J］. Chemistry & Biodiversity， 2020， 17（5）： e2000106. [百度学术]

刘炳新，韦霞，肖细姬，等. 南海软珊瑚共附生真菌Aspergillus sp. EGF15-0-3 苯甲醛类化合物研究［J/OL］. 热带海洋学报，2021，40（4）：63-69. [百度学术]

DU L, ZHU T J, LIU H B, et al. Cytotoxic polyketides from a marine-derived fungus Aspergillus glaucus[J]. Journal of Natural Products, 2008, 71(11): 1837-1842. [百度学术]

GILL M， SAUBERN S， YU J. Pigments of fungi.LXVI. the gentiobiosides of (R)- and (S)-torosachrysone from Australian toadstools and methods for assaying the enantiomeric purity of natural torosachrysone［J］. Australian Journal of Chemistry， 2000， 53（3）： 213-220. [百度学术]

梁妍，田维熙，马晓丰. 首乌藤的化学成分［J］. 沈阳药科大学学报， 2009， 26（7）： 536-538+546. [百度学术]

FUJIMOTO H， FUJIMAKI T， OKUYAMA E， et al. Immunomodulatory constituents from an ascomycete， Microasus tardifaciens［J］. Chemical & Pharmaceutical Bulletin， 1999， 47：1426-1432. [百度学术]

GROVE J F， New metabolic products of Aspergillus flavus. part II. asperflavin， anhydro-aseperflavin， and 5，7-dihydeoxy-4-methylphthalide［J］. Journal Chemical Society Perkin Trans ， 1972： 2406-2411. [百度学术]

WANG X N， TAN R X， WANG F， et al. The first isolation of a phlegmacin type pigment from the Ascomycete Xylaria euglossa［J］.Verlag der Zeitschrift für Naturforschung Tübingen-Mainz，2005， 60： 333-336. [百度学术]

GILL M， MIRGAN P M. New fungal anthraquinones［J］. Arkivoc， 2001， 7： 145-156. [百度学术]

FUJIMOTO H， NAKAMURA E， OKUYAMA E， et al. Six immunosuppressive features from an ascomycete， Zopfiella longicaudata， found in a screening study monitored by immunomodulatory activity［J］. Chemical & Pharmaceutical Bulletin， 2004， 52（8）： 1005-1008. [百度学术]

沈路路，卢燕，程志红，等. 虎杖的抗补体活性蒽醌类成分及其作用靶点［J］. 中草药， 2013， 44（18）： 2502-2507. [百度学术]

国家药典委员会. 中华人民共和国药典［M］. 北京：中国医药科技出版社， 2020： 24， 183， 217， 362. [百度学术]

于彦民，王真真.大黄素来源的研究进展综述［J］. 科技视界， 2020 （16）： 199-201. [百度学术]

摘要

在持续挖掘南海软珊瑚共附生真菌

Aspergillus

sp. EGF15-0-3结构新颖化合物的过程中，经多种柱色谱技术从其PDA培养基的乙酸乙酯部位分离得到9个色酮、蒽醌及其二聚体类化合物，通过波谱学方法：NMR、MS和ORD等并结合文献数据比对鉴定其结构分别为：eurorubrin （

）、anhydro flavomannin-quinone-6，6′-dimethyl ether （

）、asperflavin （

）、8-

-methyl ether-asperflavin （

）、emodin （

）、1-

-methyl emodin （

）、physcion （

）、rubrocristin （

）和3-

-（

-ribofuranosyl）-questin （

）。其中

由两分子

通过亚甲基桥链接而成，而

则是由torosachrysone与大黄素组成的杂合二聚体类化合物。化合物

为首次得到的天然产物，化合物

、

2、4

和

皆首次从

Aspergillus

属得到。

Abstract

In order to research the novel compounds from the soft coral-associated symbiotic and epiphytic fungus

Aspergillus

sp.EGF15-0-3， the column chroma tography with SiO

， ODS， Sephdex LH-20， RP-HPLC， and etc. were carried out， and two xanthones， five anthraquinones and two dimers were isolated from PDA medium. According to the （HR）ESI-MS， 1D and 2D NMR， ORD， UV， and comparison with the literatures， their structures were determined as eurorubrin （

）， anhydro flavomannin-quinone-6，6′-dimethyl ether （

）， asperflavin （

）， 8-

-methyl ether-asperflavin （

）， emodin （

）， 1-

-methyl emodin （

）， physcion （

）， rubrocristin （

）， and 3-

-（

-ribofuranosyl）-questin （

）.

consisted of two asperflavins， and

was a heterodimer of torosachrysone and emodin， and was a firstly natural product.

，

and

were obtained from genus of

Aspergillus

for the first time.

关键词

Aspergillus sp.EGF15-0-3色酮蒽醌（杂合）二聚体

Keywords

Aspergillus sp.EGF15-0-3xanthonesanthraquinonedimers

references

CARROLL A R， COPP B R， DAVIS R A， et al. Marine natural products［J］. Natural Products Report， 2020， 37：175-223.

CARROLL A R， COPP B R， DAVIS R A， et al. Marine natural products［J］. Natural Products Report， 2019， 36： 122-173.

BLUNT J W， CARROLL A R， COPP B R， et al. Marine natural products［J］. Natural Products Report， 2018， 35：122-173.

ZHENG C J， SHAO C L， GUO Z Y， et al. Bioactive hydroanthraquinones and anthraquinone dimers from a soft coral-derived Alternaria sp. fungus［J］. Journal of Natural Products， 2012， 75： 189-197.

SHAABAN M, SHAABAN K A, ABDELAZIZ M S.Seven naphtho-γ-pyrones from the marine-derived fungus Alternaria alternata: Structure elucidation and biological properties[J]. Organic Medicine Chemistry Letter, 2012, 2: 6.

HUANG C H， PAN J H， CHEN B， et al. Three bianthraquinone derivatives from the mangrove endophytic fungus Alternaria sp. ZJ9-6B from the South China Sea［J］. Marine Drugs， 2011， 9： 832-843.

LI D L, LI X M, WANG B G. Natural anthraquinone derivatives from a marine mangrove plant-derived endophytic fungus Eurotium rubrum: Structural elucidation and DPPH radical scavenging activity[J]. Journal of Microbiology and Biotechnology, 2009, 19(7): 675-680.

KITANAKA S， TAHIDO M. Dimeric hydroanthracenes from the unripe seeds of Cassia torosa［J］. Phytochemistry， 1982， 21（8）： 2103-2106.

ABEGAZ B M， BEZABEH M， ALEMAYEHU G， et al. Anthraquinones from Senna multiglandulosa［J］. Phytochemistry， 1994， 35（2）： 465-468.

TAKAHASHI S， KITANAKA S， TAKIDO M， et al. Phlegmacins and anhydrophlegmacinquinones： Dimeric hydroanthracenes from seedlings of Cassia torosa［J］. Phytochemistry， 1977， 16（7）： 999-1002.

OLA A R B， DEBBAB A， KURTÁN T， et al. Dihydroanthracenone metabolites from the endophytic fungus Diaporthe melonis isolated from Annona squamosa［J］. Tetrahedron Letters， 2014， 55（20）：3133-3136.

李秀婷，刘炳新，胡谷平，等. 南海珊瑚共附生真菌NG-15-3中蒽醌和含氮类次生代谢产物研究［J］. 中山大学学报（自然科学版）， 2016， 55（1）： 96-101.

FENG C, WEI X, HU J S, et al. Researches on the subergane-type sesquiterpenes from the soft coral-derived fungus Aspergillus sp. EGF15-0-3[J]. Chinese Journal of Organic Chemistry, 2020, 40(5): 1275-1280.

WEI X， FENG C， WANG S Y， et al. New indole diketopiperazine alkaloids from soft coral-associated epiphytic fungus Aspergillus sp. EGF 15-0-3［J］. Chemistry & Biodiversity， 2020， 17（5）： e2000106.

刘炳新，韦霞，肖细姬，等. 南海软珊瑚共附生真菌Aspergillus sp. EGF15-0-3 苯甲醛类化合物研究［J/OL］. 热带海洋学报，2021，40（4）：63-69.

DU L, ZHU T J, LIU H B, et al. Cytotoxic polyketides from a marine-derived fungus Aspergillus glaucus[J]. Journal of Natural Products, 2008, 71(11): 1837-1842.

GILL M， SAUBERN S， YU J. Pigments of fungi.LXVI. the gentiobiosides of (R)- and (S)-torosachrysone from Australian toadstools and methods for assaying the enantiomeric purity of natural torosachrysone［J］. Australian Journal of Chemistry， 2000， 53（3）： 213-220.

梁妍，田维熙，马晓丰. 首乌藤的化学成分［J］. 沈阳药科大学学报， 2009， 26（7）： 536-538+546.

FUJIMOTO H， FUJIMAKI T， OKUYAMA E， et al. Immunomodulatory constituents from an ascomycete， Microasus tardifaciens［J］. Chemical & Pharmaceutical Bulletin， 1999， 47：1426-1432.

GILL M， MIRGAN P M. New fungal anthraquinones［J］. Arkivoc， 2001， 7： 145-156.

FUJIMOTO H， NAKAMURA E， OKUYAMA E， et al. Six immunosuppressive features from an ascomycete， Zopfiella longicaudata， found in a screening study monitored by immunomodulatory activity［J］. Chemical & Pharmaceutical Bulletin， 2004， 52（8）： 1005-1008.

沈路路，卢燕，程志红，等. 虎杖的抗补体活性蒽醌类成分及其作用靶点［J］. 中草药， 2013， 44（18）： 2502-2507.

国家药典委员会. 中华人民共和国药典［M］. 北京：中国医药科技出版社， 2020： 24， 183， 217， 362.

于彦民，王真真.大黄素来源的研究进展综述［J］. 科技视界， 2020 （16）： 199-201.

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

来自海南红树林内生真菌ZSUH85(LK)的新蒽醌

软珊瑚Sarcophyton tortuosum共生真菌penicillium sp.的代谢产物研究

南海软珊瑚共附生真菌Aspergillus sp.EGF15-0-3中色酮、蒽醌及其二聚体类化合物

Xanthones， anthraquinone and their dimers from soft coral-associated symbiotic and epiphytic fungus Aspergillus sp.EGF15-0-3

黎咏怡

蔡金旋

方越

李家欣

钟小倩

韦霞

刘炳新

张翠仙

DOI：10.13471/j.cnki.acta.snus.2020C015

摘要

Abstract

关键词

Keywords

1 实验部分

1.1　仪器、试剂与材料

1.2　菌株EGF 15-0-3培养

1.3　菌株EGF 15-0-3的提取分离

1.4　物理常数和波谱数据

2 结果与讨论

3 结论

参考文献

摘要

Abstract

关键词

Keywords

references

论文指标

引用

Altmetric分值

关于 PlumX 指标

关于Dimensions

南海软珊瑚共附生真菌Aspergillus sp.EGF15-0-3中色酮、蒽醌及其二聚体类化合物

Xanthones， anthraquinone and their dimers from soft coral-associated symbiotic and epiphytic fungus Aspergillus sp.EGF15-0-3

黎咏怡

蔡金旋

方越

李家欣

钟小倩

韦霞

刘炳新

张翠仙

DOI：10.13471/j.cnki.acta.snus.2020C015

摘要

Abstract

关键词

Keywords

1 实验部分

1.1 仪器、试剂与材料

1.2 菌株EGF 15-0-3培养

1.3 菌株EGF 15-0-3的提取分离

1.4 物理常数和波谱数据

2 结果与讨论

3 结 论

参考文献

摘要

Abstract

关键词

Keywords

references

论文指标

引用

Altmetric分值

关于 PlumX 指标

关于Dimensions

1.1　仪器、试剂与材料

1.2　菌株EGF 15-0-3培养

1.3　菌株EGF 15-0-3的提取分离

1.4　物理常数和波谱数据

3 结论