RNA干扰技术抑制SGIV ICP18绿色荧光融合蛋白表达的研究

夏立群; 张红莲; 梁海鹰; 秦启伟

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RNA干扰技术抑制SGIV ICP18绿色荧光融合蛋白表达的研究

研究论文 | 更新时间：2023-12-11

- RNA干扰技术抑制SGIV ICP18绿色荧光融合蛋白表达的研究
- The Inhibition of Expression of SGIV ICP18GFP in FHM Cell by RNA Interferencing
- 中山大学学报(自然科学版)(中英文) 2011年50卷第1期页码：110-114
- 作者机构：
  
  1. 广东海洋大学水产学院,广东,湛江,524025
  2. 
  3. 中山大学生命科学学院∥有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广东,广州,510275
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：
  中图分类号：
- 纸质出版日期：2011，
  
  网络出版日期：2011-1-25，
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夏立群, 张红莲, 梁海鹰, 等. RNA干扰技术抑制SGIV ICP18绿色荧光融合蛋白表达的研究[J]. 中山大学学报(自然科学版)(中英文), 2011,50(1):110-114.

XIA Liqun, ZHANG Honglian, LIANG Haiying, et al. The Inhibition of Expression of SGIV ICP18GFP in FHM Cell by RNA Interferencing[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis SunYatseni, 2011,50(1):110-114.
夏立群, 张红莲, 梁海鹰, 等. RNA干扰技术抑制SGIV ICP18绿色荧光融合蛋白表达的研究[J]. 中山大学学报(自然科学版)(中英文), 2011,50(1):110-114. DOI：

XIA Liqun, ZHANG Honglian, LIANG Haiying, et al. The Inhibition of Expression of SGIV ICP18GFP in FHM Cell by RNA Interferencing[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis SunYatseni, 2011,50(1):110-114. DOI：

摘要

将含有新加坡石斑鱼虹彩病毒（Singapore grouper iridovirus，SGIV）ICP18基因的真核表达载体pEGFP-ICP18转染到胖头鲤细胞（Fathead minnow cells，FHM）中进行融合表达，用荧光显微镜观察到ICP18GFP融合蛋白呈点状分布于FHM细胞的细胞质中。根据SGIV ICP18的序列，设计并体外化学合成了特异性干扰SGIV ICP18的siRNA（siRNAICP18），与pEGFPICP18共转染到FHM细胞中，通过荧光显微镜观察不同时间点的荧光强度变化。与序列非特异性siRNA（siRNAnegative）阴性对照相比，转染后24~48 h，共转染siRNAICP18和pEGFPICP18的实验细胞中发荧光的细胞数量较阴性对照少60%~80%左右，说明体外化学合成的siRNA-ICP18可有效抑制FHM细胞中外源导入SGIV ICP18基因的表达。

Abstract

Singapore grouper iridovirus (SGIV) is a major pathogen resulting in heavy economic losses to grouper aquaculture. In this study

recombant eukaryotic vector pEGFPICP18 which inserted with SGIV ICP18 gene was transfected into Fathead minnow (FHM) cells

and ICP18GFP fusion protein was successfully expressed in FHM cells with a finely punctate cytoplasmic pattern. Candidate siRNA targeting SGIV ICP18 gene (siRNAICP18) was designed and chemically synthesized．To investigate the inhibition effect of siRNAICP18

pEGFPICP18 and siRNA were cotransfected into FHM cells

and the green fluorescence was observed by fluorescence microscope after transfection. The green fluorescence in FHM cells cotransfected with pEGFPICP18 and siRNAICP18 were 60%~80% fewer than that of negative control

which show the siRNAICP18 can effectively silence the extrinsic SGIV ICP18 gene in FHM cells during 24~48 h after transfection.

关键词

RNA干扰绿色荧光蛋白石斑鱼虹彩病毒SGIVICP18

Keywords

RNA interferencegreen fluorescent proteinsingapore grouper iridovirus (SGIV)ICP18

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